顯微鏡的分辨率是它能夠形成線(xiàn)條或點(diǎn)的單獨圖像。它是根據對象細節之間的實(shí)際距離來(lái)定義的。光的波浪性質(zhì)對可見(jiàn)光的約半波長(cháng),約250納米或四分之一微米的白光顯微鏡的分辨率提出了實(shí)際和理論上的限制。這也將最高有用放大倍數限制在1000x-2000x的范圍內。
分辨率僅取決于物鏡,因為目鏡只是放大物鏡的光線(xiàn)。除了光學(xué)質(zhì)量之外,物鏡捕獲的光錐寬度決定了它的分辨率。這取決于其設計以及樣品和物鏡之間是否使用了油。廣角設計和油浸能力都將提高物鏡的分辨能力。在任何情況下,它都不能超過(guò)上述可見(jiàn)光譜的限制。
要計算圖像比例,您需要以度為單位使用顯微鏡物鏡的視在視野。由于圖形通常不可用,圖像比例可近似如下計算:典型光學(xué)顯微鏡(以毫米為單位)的視場(chǎng)大小約為200除以放大率。例如,400倍功率顯微鏡放大倍數給出0.5毫米的視野。乘以1000得到以微米為單位的視野。對于這個(gè)例子,它是500微米。然而,數字顯微鏡通常使用較窄的視場(chǎng)目標,通常僅使用傳統光學(xué)顯微鏡產(chǎn)生與相同放大倍數相同的視場(chǎng)的三分之一。
每像素微米的圖像比例是視場(chǎng)除以相機分辨率。將視野視為視圖的長(cháng)尺寸。對于2MP分辨率的1600x1200成像設備 - 相機和上述示例的視野,數字計算為每像素500/1600或0.3微米。